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乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒紫外分光光度法

簡要描述:乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒紫外分光光度法輔酶Ⅰ系列公司正在出售的產(chǎn)品:牛津瓊脂(OXA)平板(9cm) 英文名稱:Oxford Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包 PALCAM瓊脂平板(9cm) 英文名稱:PALCAM Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包 MRS瓊脂平板(9cm) 英文名稱:MRS Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包 TCBS瓊脂平板(9cm) 英文名稱:Thiosulfate C

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-29
  • 訪  問  量:527

詳細(xì)介紹

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒紫外分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6348

產(chǎn)品分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:

測定意義:

乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內(nèi),線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化,所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注;同時,乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測方面有較廣泛的研究應(yīng)用。

測定原理

在輔酶存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會增加,測定340nm處的吸光值變化,可計算得到乙醛脫氫酶的活性。  

自備實(shí)驗用品及儀器

天平、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實(shí)驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗流程,避免實(shí)驗

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

500U 限制性內(nèi)切MboI Restriction Endonuclease -20℃保存

1kit Protein Coupling Kit   Protein Coupling Kit   常溫保存

1個 暗盒(8×10英寸) Cassette 室溫

100mL 甲酰胺 Formamide     4℃保存

50T 鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒   低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mg AMPPD AMPPD 4℃保存

2 ug T-Rex system T-Rex system 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10g 酸洗玻璃珠(直徑:200μm)  常溫

2 ug pAcAd5 CMVK-NpA  pAcAd5 CMVK-NpA  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

TSA平板  9cm*10/包

1瓶 BGC-803細(xì)胞株 BGC-803 低溫運(yùn)輸和保存

乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒紫外分光光度法DNAI1/Dynein intermediate chain 1  軸絲中鏈動力蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-ODF2(Ser796)  磷酸化子尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

TPST1  酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Histone H4  組蛋白H4抗體 規(guī)格: 0.1ml

CX3CR1  趨化因子受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml

PKC delta  蛋白激C亞性D型抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCDC28B  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Livin  凋亡抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

KLHL13  kelch樣蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2ml

HDLBP/vigilin  高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

FGF17  成纖維細(xì)胞生因子17抗體 規(guī)格: 0.2ml

Synaptotagmin 1/SYT1  突觸結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml 

 


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